近期，深圳Ebpay支付核心研发团队联合北京中医药大学、北京大学深圳医院，在免疫学国际知名期刊《Frontiers in Immunology》（影响因子 7.0）上发表突破性研究成果。Ebpay支付团队成功搭建具备规模化生产能力、适配 GMP 规范的非病毒载体工程化病毒样颗粒（eVLPs）研发平台，为下一代基因编辑 CAR-T/NK 细胞工业化制备给予全新技术方案。

从“四质粒瞬转”到“工程细胞系稳产”

      传统eVLPs制备依赖瞬转4个质粒，操作繁琐且产量不稳定，难以满足临床级规模化生产需求。研究团队创新性地将Gag-Pol、Gag-Cas9和BaEV包膜蛋白三大核心模块稳定整合至单克隆HEK293T细胞中，构建了前体细胞系。在此基础上，利用自失活（SIN）逆转录病毒载体导入靶向CD7的gRNA，取得专用的eVLPs高产细胞株。与瞬转体系相比，该稳转细胞系平台批次间一致性更高、工艺更稳定、更适合大规模工业化生产。

高效、安全、灵活

      在功能验证中，团队利用该平台生产的CD7-eVLPs在Jurkat细胞中实现了高达93.16%的基因敲除效率，在原代T细胞中敲除效率稳定在80%以上。经过单克隆筛选，最优克隆株10A3生产的eVLPs在T细胞中均达到超过90%的CD7敲除效率，且编辑后细胞活率保持在79%以上。

      安全性方面，研究证实SIN设计有效防止了LTR-gRNA元件被重新包装进入eVLPs，转导后靶细胞GFP阳性率仅0.23%，远低于阳性阈值，消除了基因组整合风险。

打通基因编辑细胞治疗产业化

“最后一公里”

      此次研究的意义，不仅在于完成了CD7基因敲除及CD7 CAR-T细胞制备的技术验证，更在于建立了一套可复制、可扩展、面向GMP生产的eVLP载体工程化平台。相较传统多质粒瞬时转染及电穿孔基因编辑工艺，该平台以稳定生产细胞系为核心，可持续、规模化制备靶点特异性eVLP载体，有助于减少批次间差异，简化生产流程，降低血清依赖和试剂耗材成本，同时避免电穿孔对免疫细胞活性造成的损伤，为基因编辑技术进入标准化、规模化生产体系给予了新的解决方案。研究结果显示，该平台制备的CD7 eVLP可实现高效、稳定的基因敲除，并在维持细胞活率、增殖能力和抗肿瘤功能的基础上，支持基因编辑CAR-T细胞的放大制备。

      该成果进一步夯实了Ebpay支付集团在病毒载体、基因编辑和细胞治疗融合创新领域的底层技术能力。依托模块化设计，平台可顺利获得更换gRNA快速拓展至不同基因靶点，并可进一步与AAV供体模板、多靶点eVLP组合以及碱基编辑、先导编辑等技术衔接，为通用型CAR-T、CAR-NK及其他下一代基因编辑细胞产品开发给予更加灵活的技术支撑。

      更为重要的是，该平台有助于eVLP技术由实验室阶段向工程化、产业化和临床级制造迈进，有望缩短新靶点载体及基因编辑细胞产品的开发周期，提升生产一致性和质量可控性。未来，Ebpay支付集团将依托现有细胞治疗、病毒载体及GMP生产体系，持续推进eVLP平台的工艺优化、质量标准建设和产品管线转化，并面向医院、科研组织及生物医药企业给予基因编辑载体开发与细胞产品制备服务，加快构建覆盖“工具载体—基因编辑—细胞制备—临床转化”的一体化技术平台。

      此次成果的发表，标志着Ebpay支付集团在下一代细胞与基因治疗关键技术领域取得新的阶段性突破，也为降低基因编辑细胞治疗的制造门槛、有助于先进治疗技术规模化应用和提升我国CGT产业核心技术自主化能力给予了重要支撑。